FLUIGENT ODROPSEQFPCK Tovejs mikrofluidisk flowsensor

Produktspecifikationer

• Produktnavn: DropSeq Fluidic
• Varenummer: ODROPSEQFPCK
• Version: oktober 20

Produktinformation

DropSeq Fluidic-protokollen har til formål at forklare, hvordan man replikerer den fluidiske del af Macosco DropSeq-protokollen ved hjælp af Fluigent-trykregulatorer i stedet for sprøjtepumper. FordelentagEn af trykregulatorernes hurtige responstider er deres hurtige generering af dråber. Trykstyring muliggør produktion af dråber i den rette størrelse på under to sekunder. Derudover muliggør flowsensorer direkte flowstyring, der efterligner funktionen af ​​en sprøjtepumpe.

Materialer og metoder:
For at implementere denne protokol skal du bruge følgende materialer:

• DropSeq-pakken
• Eksternt produkt (valgfrit)
• Forskellige komponenter som anført i indholdsbeskrivelsen

Produktbrugsvejledning

Klargøring af enheden til et nyt eksperiment:

1. Kontroller PDMS-enhederne før brug.
2. Fjern et lille område af filmen, der dækker generatorerne.
3. Tilsæt en dråbe dSURFan eller et alternativt overfladeaktivt middel i udløbet, og vent.
4. Tilslut slangen til den mikrofluidiske enhed.
5. Påfør et let tryk med Flow-EZ.
6. Vent på, at der kommer væske ud af ind-/udgangene, og indstil trykket tilbage til 0 mbar.
7. Start vortex-omrørere og tryk på reservoirerne, indtil væsken kommer ud.
8. Tilslut alle slanger i henhold til skemaet.

Igangsættelse af et eksperiment:
Efter korrekt tilslutning startes en DropSeq-kørsel ved at påføre tryk på forskellige reservoirer ved hjælp af AiO-software. Dråber bør dannes inden for få sekunder.

Flowhastighedskontrol:
Med en flowenhed kan du bruge Flow-EZ som en sprøjtepumpe. AiO-softwaren tillader flowhastighedskommandoer og justerer trykket i overensstemmelse hermed. Gem trykkonfigurationen, når den er indstillet.

PROTOKOLENS FORMÅL

• Denne protokol har til formål at forklare, hvordan man reproducerer den fluidiske del af Macosco DropSeq-protokollen ved hjælp af Fluigent-trykregulatorer i stedet for sprøjtepumper.
• Den vigtigste advantagFordelen ved trykregulatorer er de meget hurtige responstider. Ved hjælp af trykstyring kan dråber i den rigtige størrelse genereres på under to sekunder. Ved hjælp af flowsensorer er det også muligt at bruge direkte flowstyring for at bruge trykregulatoren på samme måde, som du ville bruge en sprøjtepumpe.

MATERIALER OG METODER

For at implementere denne protokol skal du bruge følgende materiale:

Produktreference Indholdsbeskrivelse
DropSeq-pakken	ODROPSEQFPCK	3 *FlowEZ 2 bar
		1 *Link
		1 *Pak 15 ml
		2 *Pak 2ml
		2 *Flowenhed M
		1 *Flowenhed L
		DropSeq PDMS-chip indeholdende 23 designs
		Flow EZ forsyningssæt
		2*Sæt til lav flowhastighed
		Sæt med høj flowhastighed
		DropSeq-tilslutnings- og slangesæt
Valgfrit produkt	IMCA001	Digitalt højhastighedsmikroskop
	DR-RE-SU-12	12 ml dSURF
	FLPG+	Trykkilde
Eksternt produkt	Stregkodede perler	Stregkodede perler: Chemgenes CSO-2011*
	Vortex mixer	Vortex-mixer: Sigma, Fisher Scientific…

Det første trin er at genskabe følgende opsætning.

PROTOKOL

Forberedelse af enheden til et nyt eksperiment
Når man starter et nyt eksperiment, anbefales det at presse al luft ud af chippen og slangen. Følg disse trin for at gøre det:

1. Før du bruger PDMS-enhederne, bedes du kontrollere generatorerne omhyggeligt. Hvis du har spørgsmål/bekymringer, er du velkommen til at kontakte os.
2. Fjern ikke filmen helt i starten: Skær venligst det lille område af for hver generator inden brug. (Alle vores PDMS-chips er dækket med forseglingsfilm, en hydrofob porøs forseglingsfilm med medicinsk klæbemiddel til vævskulturplader.)
3. Tilsæt en dråbe dSURF (eller fluoreret olie med andet overfladeaktivt stof, hvis du ikke bruger dSURF) til udløbet, før du starter eksperimentet, og vent et par minutter. Øg venligst flowhastighederne for F-olie- og vandigfasen trin for trin. Undgå at springe direkte fra 0 til ~14 mL/t (eller maksimale flowhastigheder).
4. Tilslut dSURF-slangen (eller fluoreret olie med andet overfladeaktivt stof, hvis du ikke bruger dSURF) til den højre indgangsport på mikrofluidanordningen.
5. Påfør et let tryk med Flow-EZ (ca. 200 mbar burde være nok)
6. Vent, indtil du ser noget olie komme ud af chippens åbne ind-/udgange, og indstil derefter trykket tilbage til 0 mbar.
7. Start vortex-omrørerne, og påfør et let tryk på de to andre reservoirer, indtil du ser en lille dråbe væske komme ud af enden af ​​røret.
8. Stop alt tryk og tilslut alle slanger i henhold til skemaet

Iværksættelse af et eksperiment
Når enheden er korrekt tilsluttet, er det meget hurtigt at starte en DropSeq-kørsel. Du skal blot anvende følgende tryk på de forskellige reservoirer ved hjælp af AiO-softwaren. Dråberne burde vise sig inden for mindre end et par sekunder.

• P (Olie) = 1300 mbar
• P (Celler) = 540 mbar
• P (Perler) = 580 mbar
  Disse tryk bør generere dråber på omkring 90-130 µm, hvilket fører til indkapslingshastigheder fra 1 til 3).
  Tip:
  Ved hjælp af AiO-softwaren kan trykkonfigurationer nemt gemmes. Dette gør det muligt at indstille alle tryk til et givet punkt på samme tid.

Flowhastighedskontrol

• Kombineret med en flowenhed kan Flow-EZ bruges præcis som en sprøjtepumpe. AiO-softwaren tillader flowhastighedskommandoer. En feedback-loop på flowhastigheden justerer derefter trykket til den rigtige værdi. Denne teknik kan være nyttig til at evaluere de nødvendige tryk til eksperimentet.
• Når trykkonfigurationen er i den rigtige tilstand, kan den gemmes.

  

For yderligere information, kontakt os via e-mail: contact@fluigent.com eller se vores webwebsted: www.fluigent.com.

FAQ

Hvor hurtigt kan dråber genereres ved hjælp af trykregulatorer?

Dråber i den rette størrelse kan genereres på under to sekunder ved hjælp af trykregulatorer.

Kan jeg bruge direkte flowkontrol med denne protokol?

Ja, flowsensorer muliggør direkte flowkontrol på samme måde som at bruge en sprøjtepumpe.

Dokumenter/ressourcer

FLUIGENT ODROPSEQFPCK Tovejs mikrofluidisk flowsensor [pdf] Brugsanvisning ODROPSEQFPCK, IMCA001, DR-RE-SU-12, ODROPSEQFPCK Tovejs mikrofluidisk flowsensor, ODROPSEQFPCK, Tovejs mikrofluidisk flowsensor, Mikrofluidisk flowsensor, Flowsensor

Referencer

• Brugermanual